淫羊藿及其有效成分对机体免疫作用的研究进展

冯沙沙，李牧， 张铁*

(河北农业大学动物医学院 保定 071000)

摘要：淫羊藿是一种天然中草药，有研究表明淫羊藿及其有效成分总皂苷、多糖对集体的免疫系统有促进作用。因此，淫羊藿越来越受到人们的广泛关注和研究。本文对淫羊藿对动物免疫器官、特异性和非特异性免疫作用的研究进展作一综述，以便为淫羊藿在临床上的应用提供参考。

关键词：淫羊藿；多糖；总皂苷；免疫作用

淫羊藿[Herba Epimdii]为小檗科[Berberidaceae]多年生草本植物，又名三枝九叶草等，亦称“仙灵脾”，是我国传统补益类中药，全草入药具有味辛、甘，性温，归肝、肾二经，补肝肾、强筋骨、祛风湿的功效[1]。现代化学成分研究表明，其主要有效成分是淫羊藿多糖(EPS)、淫羊藿苷(ICA)、淫羊藿总黄酮(TFE)，中药药理研究表明淫羊藿具有调节机体免疫功能,增强雄性生殖功能，延缓肾功能衰竭的进程，扩张血管，改善血液流变学和促进造血系统功能等作用。近年来，大量实验研究表明，淫羊藿及其提取物对机体免疫功能有显著增强和调节作用。

1对非特异性免疫作用的影响

1.1对免疫器官的影响

陈玮等[2]研究表明，淫羊藿能对氢化可的松造成的肾阳虚小鼠的胸腺系数(主要是器官系数,，mg/100g)降低,提高小鼠的免疫能力。王刚等[3]的研究表明：淫羊藿多糖可显著提高小鼠因荷瘤所导致的胸腺指数下降，溶血素形成减少，溶血空斑值降低及迟发性超敏反应低下。荷瘤鼠的脾指数也显著升高，即淫羊藿多糖可显著提高荷瘤小鼠的免疫功能。EPS连续注射七天,可使小鼠胸腺和脾脏细胞产生IL-2能力显著提高[4]。且有研究表明EPS注射后胸腺内并无细胞变性坏死，组织结构基本正常。由此提示EPS的胸腺缩小作用不是免疫抑制的结果，而是其增强机体细胞免疫功能的机制之一。ICA也具有免疫激活作用，能增强T细胞功能，促进脾细胞数增加[5]。ICA15-60mg/kg·d连续注射7日，可使小鼠脾脏显著增大，脾有核细胞数明显增加,表明ICA能促进抗原激活的淋巴细胞增殖，但它对胸腺作用不明显[6]。TFE25mg/kg·d连续给药7天，对胸腺和脾脏大小、脾脏有核细胞数及外周血白细胞数均无明显影响[7]。

1.2对单核吞噬细胞系统功能的影响

罗昭华等[8]的研究表明，ICA可以呈剂量依赖性的使脂多糖引起的腹腔白细胞介素-1和肿瘤坏死因子增多恢复到接近正常水平，能使巨噬细胞吞噬功能获得部分恢复，对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能有明显增强作用。胡元亮等[9]用0.2ml和0.4ml淫羊藿-蜂胶佐剂分别对3日龄雏鸡皮下注射，于24日龄时用相同剂量重复注射1次，以注射后不同时间检测鸡腹腔巨噬细胞的吞噬活性；对28日龄小白鼠隔日皮下注射淫羊藿-蜂胶佐剂0.2ml,并以环磷酰胺为对照。结果表明，淫羊藿-蜂胶佐剂能显著提高雏鸡腹腔巨噬细胞的吞噬活性，其中0.4ml剂量组明显优于0.2ml剂量组；能明显增强小白鼠腹腔巨噬细胞的细胞毒效应，并能拮抗环磷酰胺的免疫抑制作用。郝炳华等[10]在研究TFE对荷瘤小鼠细胞免疫及红细胞免疫功能的影响时发现：与荷瘤对照组巨噬细胞吞噬率相比，不同剂量TFE给药组巨噬细胞吞噬率均显著增高(P<0.01）且随着给药剂量的增加，吞噬率增加。提示TFE可促进巨噬细胞的非特异性杀伤肿瘤细胞作用，对荷瘤小鼠低下的细胞免疫功能具有一定的恢复作用。证明淫羊藿、淫羊藿多糖和淫羊藿苷均可以提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能,并能使受环磷酰胺损伤的小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能恢复至正常水平。

1.3对自然杀伤细胞(NK)和LAK细胞的调节作用的影响

自然杀伤细胞通过直接接触和抗体依赖性细胞毒性作用(ＡＤＣＣ)对多种肿瘤细胞和病毒感染细胞有较强的杀伤作用和重要的免疫调节作用。淫羊藿能显著增强免疫功能低下小鼠的ＮＫ细胞活性,对下丘脑-垂体-肾上腺-胸腺轴抑制模型大鼠的ＮＫ细胞活性也能显著提高。孙奕等[11]研究表明，TFE在低剂量时能明显提高羟基脲造成免疫能力低下小鼠的ＮＫ细胞活性，并与ＴＦＥ剂量呈量效关系。李晓燕等[12]研究报道，淫羊藿苷不仅能提高不同效靶比的ＬＡＫ杀伤和ＮＫ样杀伤活性，并且能阻断逆转转化生长因子β2(ＴＧＦβ2)的抑制作用，将受抑的ＬＡＫ杀伤活性和ＮＫ样杀伤活性恢复至正常水平。

1.4对红细胞的影响

红细胞免疫是机体的一种防御机制，红细胞通过细胞表面补体受体的蛋白质粘附免疫复合物，将其带到肝、脾，免疫复合物被巨噬细胞所吞噬，使病理性循环免疫复合物被清除，在抗疾病、抗肿瘤中发挥着重要的作用。罗燕等[13]为探讨淫羊藿多糖对雏鸡免疫功能和禽流感-新城疫重组二联苗免疫效果的影响，将80只1日龄雏鸡随机分为4组，每组20只，分别于1日龄皮下注射生理盐水及12.5、25.0和50.0mg/ml淫羊藿多糖，连续7d，于7、14、21、28、35、42、49、56日龄采血，检测淋巴细胞转化率、中性粒细胞吞噬力、AI和ND抗体效价、红细胞免疫功能。结果表明，不同浓度淫羊藿多糖均能显著提高淋巴细胞转化率、中性粒细胞吞噬力、AI-HI和ND-HI抗体效价和红细胞-C3b花环率，降低红细胞-IC花环率，且中剂量效果较好。证明淫羊藿多糖作为免疫佐剂，具有很好的研究价值与应用前景。

2对细胞免疫作用的影响

2.1对淋巴细胞的影响

熊平源等^[14]采用3H-TdR标记法，测定淫羊藿对刀豆蛋白A(ConA)诱导小鼠T淋巴细胞的转化活性影响，结果显示不同浓度淫羊藿处理后的小鼠淋巴细胞与ConA共同培养48h后，与造模对照组比较，药物Ⅱ组和药物Ⅲ组均能明显增强ConA诱导淋巴细胞的转化活性(P<0.01)。证明中、高剂量组均能增强ConA诱导小鼠T淋巴细胞的转化活性(P<0.01)。现代研究认为淫羊藿可以促进Ｔ淋巴细胞的增殖，提高机体细胞免疫功能，而淫羊藿总黄酮可提高Ｔ淋巴细胞亚群CD4⁺的水平。郝炳华等^[10]研究表明，淫羊藿总黄酮能显著提高腹腔Ｔ淋巴细胞的转化率，且随着给药剂量的增加,其作用显著增加。

2.2对T淋巴细胞CD3、CD4、CD8、CD4/CD8阳性细胞百分率的影响

熊平源等[14]用流式细胞仪检测CD3、CD4、CD8、CD4/CD8的阳性表达率[15]。结果显示，不同浓度淫羊藿处理后，能促进60COγ射线照射小鼠CD4/CD8T淋巴细胞的恢复，增加CD4/CD8T淋巴细胞比值。药物处理各组与造模对照组比较，各剂量组CD8阳性细胞百分率明显降低，CD4/CD8阳性细胞百分率显著提高(P<0.01)。

3对体液免疫作用的影响

Ｂ淋巴细胞是免疫系统中产生抗体的细胞，分化为浆细胞分泌免疫球蛋白，发挥体液免疫的作用。EPS能增加裸鼠脾细胞的3H-TdR掺入，说明它对Ｂ细胞有刺激增殖的作用，但是此增殖作用不如T细胞敏感,表现为小剂量时促进T细胞增殖，大剂量时B细胞才出增殖[16]。王德云等[17]选择4种中药成分（黄芪多糖、淫羊藿多糖、蜂胶多糖、人参皂苷）组成2个复方，采用MTT法和微量血凝法测定T淋巴细胞转化和血清抗体效价的动态变化。结果表明，中药佐剂能显著促进淋巴细胞转化，提高血清抗体效价，证明复方中药佐剂与疫苗合用能显著提高机体的体液免疫功能。TFE对“阳虚”动物抗体滴度有明显促进作用，并可使“阳虚”小鼠低下的抗体形成细胞功能趋于恢复正常[18]。TFE可显著提高小鼠的RBC-C30R花环率，同时低剂量的TFE还能显著降低RBC-IC花环率,高剂量组TFE对RBC-IC花环率的作用不明显[10]提示低剂量的TFE可明显减少机体循环免疫复合物,高剂量的TFE对机体循环免疫复合物的清除作用意义不大。此外,EPS和TFE虽然都能增强体液免疫功能，但它们的作用机理不尽相同。EPS通过对脾脏抗体生成细胞的影响,既增加脾脏抗体生成细胞数，又促进每个浆细胞产生抗体；而TFB则通过影响免疫调节环路中的抑制性成分来发挥作用。虽然脾脏抗体生成细胞数增多，但未促进每个浆细胞产生抗体。

4在畜牧兽医上的应用前景

淫羊藿属植物分布于中国、北非、意大利北部至黑海、喜马拉雅山、朝鲜、日本和东南亚等地，全属共有55种左右。中国有47种，是该属的现代地理分布中心[19]。淫羊藿的主要化学成分为黄酮类，其次为多糖、木脂素类、紫罗酮类、苯乙醇类和生物碱类等。此外，陈惠玲等研究表明，黔产箭叶淫羊藿、粗毛淫羊藿和黔岭淫羊藿中均含有所测的10中微量元素，即Zn、Mn、Fe、Cu、Ni、Li、Sr、Co、Ca、Mg等。他们都具有补肾及增强人体免疫系统功能的效用[20]。近年来，由于淫羊藿可以促进造血功能、提高免疫力等功效，人们逐步接受其作为医疗保健药。因此淫羊藿具有很高的研究价值，应大力开展对淫羊藿淫羊藿及其有效成分的研究、开发、利用，创造良好的价值。

参考文献

[1] 王昌林,李昱,王粤新.淫羊藿及其有效成分的药理研究概况[J].中国中药杂志,1998,23(3):183-185.

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[3] 王刚,徐颖.淫羊藿多糖对荷瘤小鼠免疫功能的影响[J].武警医学院学报,2003,12(3):194-196.

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[8] 罗昭华,唐彦萍,袁谨,等.淫羊藿甙对巨噬细胞ｉＮＯＳ和ＴＮＦ-αｍＲＮＡ的影响.遵义医学院学报,2005,28(5):409-411.

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[11] 孙奕,王景明,骆永珍.淫羊藿总黄酮促进免疫功能低下小鼠ＩＬ-2和ＮＫ活性的实验研究.中草药,2002,33(7):635-637.

[12] 李晓燕,张玲,王芸,等.淫羊藿甙逆转转化生长因子β2对ＬＡＫ、ＣＤ3ＡＫ细胞的免疫抑制作用.中国免疫学杂志,2000,16(5):266-270.

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[14] 熊平源,郭凯文,唐朝辉,等.淫羊藿对小鼠免疫功能的调节作用.数理医药杂志,2007,20(1):50-52

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[16] 丁雁,邢善田,周金黄.淫羊藿多糖促进小鼠Ｔ和Ｂ细胞3H-TdR掺入和诱生干扰素作用的研究.中国免疫学杂志,1985,1(6):42.

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[19] STEARN W T.The Genus Epimedium and Other Herbaceous Beridace-ae[M].Portland,Oregon:Timber Press,2002:174-176.

[20] 陈惠玲,吴珍云,杨华等.3种黔产淫羊藿微量元素的含量测定[J].微量元素与健康研究,2001,18(1):39-40.